【基础知识】光学显微镜的基本观察方式——RC观察
浮雕相衬(RC)观察,是一种利用特定技术增强透明标本表面明暗差异,提高观察对比度的观察方法。
RC观察的原理在于斜射光照射到标本时产生折射和衍射,通过物镜光密度梯度调节器产生不同的阴影,从而使标本表面产生明暗差异。这种观察方式不仅可以提高未染色标本的可见性和对比度,而且其图像显示阴影或近似三维结构,不会产生光晕,有助于更清晰地观察样本。
RC观察具有广泛的应用领域,例如可以检测双折射物质(如岩石切片、水晶、骨头),还可以观察玻璃、塑料等培养皿中的细胞、器官和组织。此外,聚光镜的工作距离可以设计得更长,RC物镜也可用于明场、暗场和荧光观察,显示出其功能的多样性。
在显微操作中,RC观察方式尤为重要。由于它能产生高反差的3D图像,非常适合用于塑料器皿中的样品观察,使操作更为精确和方便。因此,在进行细胞或早期胚胎操作时,RC观察是显微操作技术的理想选择。
综上所述其:
优点:
强立体成像效果,无光晕,塑料/玻璃培养器皿适用,可检测双折射性物质;
聚光镜的工作距离大于DIC,背景与标本的亮度变化可调节。
缺点:
调试、使用稍复杂。
应用:
显微操作,内部结构、外部形态观测等。
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